基因芯片技術(shù)就是順應(yīng)這一科學(xué)發(fā)展要求的產(chǎn)物,它的出現(xiàn)為解決此類問題提供了光輝的前景。
隨著人類基因組(測序)計劃(Humangenomeproject)的逐步實施以及分子生物學(xué)相關(guān)學(xué)科的迅猛發(fā)展,越來越多的動植物、微生物基因組序列得以測定,基因序列數(shù)據(jù)正在以所未有的速度迅速增長。然而,怎樣去研究如此眾多基因在生命過程中所擔(dān)負(fù)的功能就成了世界生命科學(xué)工作者共同的課題。為此,建立新型雜交和測序方法以對大量的遺傳信息進(jìn)行高效、快速的檢測、分析就顯得格外重要了。
基因芯片又稱為DNA微陣列(DNAmicroarray),可分為三種主要類型:
1、固定在聚合物基片(尼龍膜,硝酸纖維膜等)表面上的核酸探針或cDNA片段,通常用同位素標(biāo)記的靶基因與其雜交,通過放射顯影技術(shù)進(jìn)行檢測。這種方法的優(yōu)點是所需檢測設(shè)備與目前分子生物學(xué)所用的放射顯影技術(shù)相一致,相對比較成熟。但芯片上探針密度不高,樣品和試劑的需求量大,定量檢測存在較多問題。
2、用點樣法固定在玻璃板上的DNA探針陣列,通過與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。這種方法點陣密度可有較大的提高,各個探針在表面上的結(jié)合量也比較一致,但在標(biāo)準(zhǔn)化和批量化生產(chǎn)方面仍有不易克服的困難。
3、在玻璃等硬質(zhì)表面上直接合成的寡核苷酸探針陣列,與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。該方法把微電子光刻技術(shù)與DNA化學(xué)合成技術(shù)相結(jié)合,可以使基因芯片的探針密度大大提高,減少試劑的用量,實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和批量化大規(guī)模生產(chǎn),有著十分重要的發(fā)展?jié)摿Α?/div>