Mallory染色

實(shí)驗(yàn)材料

Mallory試劑盒、95%乙醇、無(wú)水乙醇、二甲苯、中性樹(shù)脂

Mallory染色過(guò)程：

1. 組織準(zhǔn)備

• ?固定?：將組織樣本固定于10%福爾馬林固定液中，以保存其形態(tài)和化學(xué)成分。

• ?脫水包埋?：將固定后的組織進(jìn)行常規(guī)脫水處理，然后用石蠟包埋，以便切片。

2. 切片與脫蠟

• ?切片?：使用切片機(jī)將包埋好的組織切成4μm厚的石蠟切片。

• ?脫蠟?：將切片置于一系列不同濃度的乙醇中，使石蠟逐漸溶解并脫去，最終將切片水化至水相。

3. 氧化與漂白

• ?氧化?：將切片浸入酸化gaomengsuanjia溶液中氧化一定時(shí)間（通常為5分鐘），以增強(qiáng)組織的染色效果。

• ?水洗?：用蒸餾水或自來(lái)水輕輕沖洗切片，去除殘留的gaomengsuanjia溶液。

• ?漂白?：將切片浸入草酸溶液中漂白1~2分鐘，以去除多余的氧化產(chǎn)物，并準(zhǔn)備進(jìn)行染色。

4. 染色

• ?PTAH染色?：將切片浸入Mallory PTAH染色液（自然氧化法）中，加蓋浸染24~48小時(shí)。此步驟是染色的核心，磷鎢酸蘇木素將與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合，形成鮮明的染色效果。

5. 分色與脫水

• ?分色?：用95%的乙醇迅速洗去切片上多余的染液，此步驟需迅速進(jìn)行，以避免顏色過(guò)度脫失。

• ?脫水?：將切片依次置于更高濃度的乙醇中進(jìn)行脫水處理，直至無(wú)水乙醇。

6. 透明與封固

• ?透明?：使用二甲苯等透明劑對(duì)切片進(jìn)行透明處理，以去除切片中的乙醇并增加其透明度。

• ?封固?：最后，用中性樹(shù)膠將切片封固在載玻片上，以便長(zhǎng)期保存和觀察。

染色結(jié)果：

Mallory染色是一種在生物化學(xué)和病理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的染色方法，特別用于結(jié)締組織的染色。它主要用于顯示膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分，使得在顯微鏡下觀察時(shí)，這些結(jié)構(gòu)能夠更清晰地呈現(xiàn)出來(lái)。

Mallory染色通常使用酸性品紅或天青B等酸性染料，并結(jié)合磷鎢酸或磷鉬酸等媒染劑。這些酸性染料能夠與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合，而媒染劑則能增強(qiáng)染料的染色效果，使得染色更加鮮明和持久。

通過(guò)Mallory染色，病理學(xué)家可以更容易地觀察和分析結(jié)締組織中的膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分，從而幫助診斷與這些結(jié)構(gòu)相關(guān)的疾病。例如，在肝臟疾病的診斷中，Mallory染色可以幫助識(shí)別肝硬化時(shí)肝小葉結(jié)構(gòu)的變化和膠原纖維的增生情況。

需要注意的是，Mallory染色是一種比較復(fù)雜的染色方法，需要經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員進(jìn)行操作。同時(shí)，染色結(jié)果也可能受到多種因素的影響，如染液的濃度、染色時(shí)間、洗滌條件等。因此，在進(jìn)行Mallory染色時(shí)，需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，以確保染色結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。